Mise en évidence d'un gène de glutathion S-transférase exprimé au cours des stades précoces de l'embryogenèse somatique de la chicorée

Chez le Cichorium hybride "474" (Cichorium intybus var. Sativum x Cichorium endivia var. Latifolia), l'embryogenese somatique est directe et d'origine unicellulaire. De plus, la premiere division embryogene peut etre retardee par l'addition de glycerol dans le milieu lors de la phase d'induction et synchronisee lors du transfert des tissus dans un milieu d'expression depourvu de glycerol. Ces trois caracteristiques, specifiques du modele chicoree, facilitent l'etude des mecanismes inducteurs precoces de l'embryogenese somatique. Au cours de cette etude, nous avons utilise la technique de "differential display" (DD RT-PCR) afin de mettre en evidence des modifications dans l'expression des genes au cours des stades precoces de l'embryogenese somatique de la chicoree. Nous avons compare les populations d'ARNm accumules dans les fragments foliaires places en conditions d'embryogenese somatiques pendant 0, 1, 2, 3, 4 et 7 jours. Un ADNc partiel presentant de fortes homologies avec des GSTs de plantes inductibles par l'auxine a ainsi ete isole. Il s'accumule fortement dans les fragments foliaires du genotype embryogene "474", mais pas chez le genotype non embryogene Pevele. La sequence complete de cet ADNc, nomme CHI-GST1, a ete reconstituee apres amplification de la partie 5' par RACE-PCR. Des experiences d'hybridation in situ et d'immunolocalisation nous ont permis de localiser les transcrits et le produit du gene CHI-GST1 dans les tissus foliaires. Les resultats obtenus suggerent l'existence de plusieurs isoformes de GSTs chez la chicoree dont une serait specifique des cellules reactivees et des cellules embryonnaires.