sHLA-G1重链分子、β2m的体外表达及纯化研究

目的获得sHLA-G1重链分子及轻链β2微球蛋白（β2m）基因体外表达并纯化的相关蛋白质。方法RT-PCR扩增可溶性HLA-G1重链分子及人β2ITI轻链的cDNA序列，构建表达载体pET28a（＋）／sHLA-G1及pET28a（＋）／β2ITI，导入大肠杆菌BL21（DE3），IPTG诱导sHLA-G1及β2m蛋白表达，并以Ni-NTA亲和层析和CM-FF弱阳离子柱分别纯化，透析后浓缩保存。SDS-PAGE，Western-Blot鉴定目的蛋白的表达和纯化。结果成功克隆了sHLA—G1及尼m基因并构建了pET28a（＋）-sHLA-G1、pET28a（＋）-β2m原核高效表达载体；表达产物以可溶性形式存在，表达量〉30％，纯化后产物纯度达到95％。结论成功表达并纯化出的sHLA-G1重链分子及轻链β2m有助于阐明可溶性HLA-G1的功能。