白菜型冬油菜铁超氧化物歧化酶（Fe-SOD）基因的克隆及表达分析

【目的】了解SOD酶蛋白家族Fe-SOD在超强抗寒冬油菜中的表达情况及其在低温胁迫下的作用。【方法】采用RT—PCR技术克隆超强抗寒白菜型冬油菜陇油7号Fe-SOD的cDNA序列。对该序列进行生物信息学分析，采用半定量以及相对定量RT—PCR研究Fe-SOD在低温胁迫下的表达模式，采用氮蓝四唑（NBT）光还原法测定冬油菜叶片和根中的总SOD酶活性。【结果】获得尼硼GenBank登录号为KF178713，该基因cDNA片段全长645bp，包含一个639bp完整的开放阅读框，编码212个氨基酸的蛋白质，与白菜（chiifu）的蛋白质氨基酸序列同源性高达99％。该基因编码的酶蛋白是1个主要由α螺旋组成的亲水性稳定蛋白，无信号肽，无跨膜结构域。Fe-SOD表达模式分析显示初期低温胁迫下（4℃），该基因上调表达，继续低温胁迫处理（-4℃和-8℃），Fe-SOD表达量受到抑制。总SOD酶活性测定显示冬油菜根中酶活性高于叶片，以利于冬油菜安全越冬。【结论】从白菜型冬油菜克隆的Fe-SOD具有已知物种Fe-SOD的特征。Fe-SOD在冬油菜品种陇油7号抗寒过程中起作用。