重组pEGFP-C2-FOXC1-C真核表达质粒的构建与表达

目的：将人FOXC1-C基因定向连入pEGFP-C2质粒,使FOXC1-C蛋白可与绿色荧光蛋白在HeLa细胞内融合表达,为进一步研究FOXC1-C蛋白的功能及定位奠定实验基础。方法：采用EcoR I和NotI双酶切方法,从pcDNA3.1（＋）-FOXC1-C质粒中获得FOXC1-C蛋白的cDNA羧基末端;连入pEGFP-C2质粒的C端。将构建成功的pEGFP-C2-FOXC1-C质粒转染入HeLa细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达。结果：（1）将该质粒进行双酶切鉴定可见FOXC1-C片段;（2）转染重组质粒后可观察到绿色荧光蛋白的表达。结论：（1）FOXC1-C cDNA羧基末端成功连入pEGFP-C2质粒（;2）FOXC1-C蛋白可与绿色荧光蛋白在HeLa细胞中融合表达。