泛耐药细菌NDM-1基因Taqman PCR 快速检测方法的建立

产NDM-1（New Delhi Metallo-β-laetamase1，I型新德里金属β-内酰胺酶）细菌是新近报道的一种泛耐药细菌，由于对绝大多数常用抗生素均耐药，又被称为超级细菌。目的：建立一种可快速检测泛耐药细菌NDM-1基因的Taqman探针实时荧光定量PCR法。方法：根据NDM．1基因序列，设计引物和Taqman探针，建立Taqman探针实时定量PCR检测方法，对方法的敏感性、重复性和特异性进行了评价，并对临床模拟标本中的产NDM-1细菌进行了检测。结果：该方法在9个浓度（5×10^0～5X10^8拷贝）梯度范围内呈现很好的线性关系，检测灵敏度可达5个质粒拷贝，与不含NDM-1基因的肠杆菌无交叉反应，对尿液模拟标本的检出限为10CFU，可快速准确地检出临床样本中分离的NDM-1阳性菌株。结论：建立的Taqman探针实时荧光定量PCR法具有快速、简单、灵敏度高和特异性强等优点，可应用于临床上泛耐药细菌NDM．1基因的核酸检测。