重组人半乳凝集素-1的原核表达、纯化及生物活性检测

目的：在大肠杆菌中表达半乳凝集素-1（galectin-1）,并进行纯化及生物活性检测。方法：将人半乳凝集素-1基因克隆至带有His融合标签的原核表达载体pQE-30上,转化大肠杆菌M15,经IPTG诱导表达,表达产物经亲和层析纯化后,进行Western印迹鉴定,并用红细胞凝集试验检测其生物学活性。结果：双酶切鉴定和核苷酸序列测定表明重组表达质粒pQE-30-Galectin-1构建正确;重组蛋白的表达量约占菌体总蛋白的50%,主要以可溶形式表达,纯化后蛋白纯度达95%以上,且具有良好的红细胞凝集活性。结论：在大肠杆菌中表达了重组人半乳凝集素-1,且具有良好的生物活性。