Desarrollo y caracterización farmacocinética y farmacológica de nuevas formulaciones parenterales de anfotericina B

El objetivo principal de esta Tesis Doctoral ha sido el desarrollo farmacotecnico y farmacologico de nuevas formulaciones parenterales de anfotericina B en forma de microemulsiones destinadas al tratamiento de micosis sistemicas asociadas a estados de inmunodepresion, que mejoren desde los puntos de vista toxicologico, farmacocinetico y de eficacia a las formulaciones de anfotericina B ya comercializadas. Para ello se disenaron diversas formulaciones del farmaco en microemulsiones parenterales, se realizo la comparacion de distinas tecnicas de emulsificacion y de distintos tensioactivos. Se caracterizaron las microemulsiones por PCS, y se realizaron estudios de viscosidad. Tambien se evaluo el contenido en principio activo de las microemulsiones y se evaluo su estabilidad. Se realizaron estudios farmacocineticos en animales de experimentacion (conejos), usando diferentes dosis y mdos de administracion de estas nuevas formulaciones de anfotericina B para determinar la cinetica de distribucion y eliminacion del farmaco en comparacion con la formulacion comercial Fungizona®. Se realizo un primer ensayo de las formulaciones tras la administracion de una dosis de 1mg/kg en bolus i.v., con el fin de realizar un estudio comparativo del comportamiento farmacocinetico de las distintas formulaciones. Se realizo un segundo estudio mediante la administracion de diferentes dosis de una de las microemulsiones administradas por via i.v., en bolus, con el fin de comprobar la posible farmacocinetica dosis dependiente. Por ultimo se realizo un estudio comparativo de una de las microemulsiones y la formulacion comercial (Fungizona ® ), tras se administradas por perfusion i.v., en una dosis de 1 mg/kg durante 4 dias en conejos con el fin de realizar un estudio comparativo de ambas formulaciones segun se emplean a nivel hospitalario para el tratamiento de micosis sistemicas. El uso de la anfotericina B por via parenteral se ve altamente limitado por los elevados efectos toxicos secundarios que presentan, por ello se realizaron estudios toxicologicos y de eficacia con el fin de comprobar que los efectos nefrotoxicos de la anfotericina B se reducian al administrarse en forma de microemulsion sin reducir su efecto terapeutico frente a infecciones fungicas a nivel sistemico en organismos vivos. En una primera parte se determino la toxicidad aguda en dosis unica en ratones (calculo de la Dosis Letal 50 (DL50)) y posteriormente se determino la toxicidad subaguda tras la administracion de dosis multiples de las microemulsiones de anfotericina B en comparacion con la formulacion comercial Fungizona® en ratones y conejos mediante el analisis de parametros sanguineos y analisis histopatologicos renales. Finalmente se realizaron estudios de eficacia empleando una levadura patogena, Candida albicans, en un modelo de infeccion sistemcia en ratones inmunocompetentes y en ratones neutropenicos, mediante la medida del tiempo de supervivencia de los animales y la colonizacion de las cepas de Candida albicans en los organos diana rinones y cerebro. Se realizo un analisis estadistico de los datos obtenidos para confirmar la significacion de los resultados obtenidos