绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子表达载体pEGFP—C1—hri的构建及鉴定

目的构建表达绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子的表达载体pEGFP—C1—hri，为探讨人核糖核酸酶抑制因子抗肿瘤作用的分子机制打下基础。方法用亚克隆法，将目的片段从表达载体pGEX-6p-1-hri克隆到pEGFP-C1上，用双酶切筛选得到阳性重组质粒pEGFP—C1—hri，用脂质体法将其瞬时转染到小鼠黑色素瘤细胞B16中，在荧光显微镜下检测其表达。结果pEGFP—C1—hri中插入了hri序列，绿色荧光高效表达于B16细胞浆中。结论pEGFP—C1—hri表达载体已成功构建。