Determinación del RNA genómico y replicativo del virus de la hepatitis C en pacientes tratados con interferón

En este ensayo se trato de correlacionar la evolucion clinica e histologica de un grupo de pacientes tratados con IFN, con la presencia del RNA genomico y replicativo del HCV en plasma y tejido hepatico. Se estudiaron 11 pacientes con hepatitis cronica "C" diagnosticada por elevacion de transaminasas durante los ultimos 6 meses, anti-HCV positivo "(Elisa II)", y cuadro histologico compatible. En todos ellos se efectuo biopsia hepatica y extraccion de sangre en paralelo, inmediatamente antes y despues de finalizar el tratamiento con 4.5 millones de IFN Alfa2a administrado 3 veces por semana, durante 6 meses. El tecijo hepatico se almaceno a-80 los c y el plasma a-20 los c hasta su procesamiento. La extraccion de RNA se realizo a partir de 100microliter de plasma y de 20mg de tejido hepatico con isotiocianato de guanidinio (Chomcznski). La transcripcion reversa se llevo a cabo "primers" sense o antisense para detectar la helice replicativa (-) o genomica (+) respectivamente. El cDNA de la region 5' no codificante fue amplificado por el sistema "nested". Antes del tratamiento los 11 pacientes evidenciaron la presencia de la helice genomica en tecijo hepatico y plasma. En cambio la helice replicativa se detecto en 5 casos en higado, 7 pacientes se revelaron como respondedores y 4 como no respondedores. En los pacientes respondedores las helices genomica y replicativa en higado desaparecieron en un 43 por ciento y 57 por ciento respectivamente, y en plasma se observo un descenco del 71 por ciento para la helice genomica y de un 100 por ciento para la helice replicativa. En los 4 pacientes no respondedores la helice genomica permanecio en tecijo hepatico y plasma, en cambio la replicativa se mantuvo en tejido hepatico y se negativizo en un 75 por ciento en plasma. El indice de Knodell, que determina el estadio histologico, disminuyo en 5 de lo 7 respondedores y permanecio igual en 3 de los 4 no respondedores...(AU)