CRIOPRESERVAÇÃO DE EMBRIÕES ZEBUÍNOS PRODUZIDOS IN VITRO PELA TÉCNICA DA VITRIFICAÇÃO COM REDUÇÃO ARTIFICIAL DA BLASTOCELE

A criopreservacao de embrioes e gametas e pre-requisito basicos para a estocagem de material genetico por periodos prolongados. Atualmente o grande desafio neste campo tem sido a criopreservacao de embrioes zebuinos produzidos in vitro. Uma alternativa para criopreservar estes embrioes e a vitrificacao. A blastocele pode prejudicar o resultado da criopreservacao de embrioes devido a grande quantidade de liquido em seu interior, aumentando assim a possibilidade de formacao de cristais de gelo. O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito da ablacao mecânica da blastocele de embrioes zebuinos produzidos in vitro, antes da vitrificacao. Ovocitos obtidos de ovarios oriundos de matadouros foram maturados, fertilizados e cultivados in vitro. Os blastocistos foram submetidos a ablacao mecânica da blastocele por meio de uma incisao com auxilio de uma microlâmina, com auxilio de estereomicroscopio (40x). Foram vitrificados em solucao de etilenoglicol (20%) e DMSO (20%), em palhetas OPS. Apos a desvitrificacao e cultivo in vitro por 48 h, sera determinada a taxa de eclosao e a quantificacao de celulas integras e lesadas, pela marcacao dupla com laranja de acridina e iodeto de propidio. Ate o presente momento foram vitrificados 60 embrioes, divididos aleatoriamente entre o tratamento controle e aqueles que sofreram a ablacao da blastocele. Melhorias nas taxas de sobrevivencia embrionaria apos a desvitrificacao poderao contribuir para incorporar esta importante ferramenta do melhoramento genetico a producao comercial de embrioes, de forma viavel e economica.