E2F1介导8-氯-腺苷引起的人肺癌细胞H1299的凋亡
2008
8-氯-腺苷(8-Cl-adenosine,8-Cl-Ado)可诱导人非小细胞性肺癌细胞H1299发生凋亡,但其分子机制还没有阐明.首先用四唑盐(MTT)比色法检测了8-Cl-Ado对H1299细胞的生长抑制作用.进一步采用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测了8-Cl-Ado处理H1299细胞后,procaspase-3的激活情况以及E2F1的蛋白水平.通过用pcDNA-HA-E2F1表达载体和pSUPER-E2F1 RNA干扰载体分别转染H1299细胞,研究在E2F1过表达和RNA干扰(RNAinterference,RNAi)两种情况下对凋亡的影响.实验结果表明,8-Cl-Ado可抑制H1299细胞的生长,激活凋亡关键执行蛋白procaspase-3,升高E2F1蛋白水平.当E2F1过表达后,同时伴有procaspase-3的激活,而E2F1表达受到抑制后,与对照相比,8-Cl-Ado引起的procaspase-3的激活被明显抑制,说明E2F1介导8-Cl-Ado引起的人肺癌细胞H1299的凋亡.
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