Reconditionnement des greffons rénaux (GR) chez un modèle porcin de donneurs décédés par arrêt cardiaque (DDAC) pris en charge par circulation régionale normothermique (CRN)

Introduction Une modalite recente de prise en charge des DDAC consiste a mettre en place une CRN pour reperfuser avec du sang reoxygene du donneur a 37 °C les reins. Le but de cette etude est de mettre en evidence certains mecanismes de reconditionnement des GR par la mise en place d’une CRN. Materiel et methodes Apres accord du Comite d’ethique (n o  CE2012-11) une CRN a ete mise en place chez 18 porcs ( Large white , 40–45 kg) apres 30 min d’arret circulatoire. Les reins ont ete reperfuses par la CRN pendant 0 h ( n  = 6), 2 h ( n  = 6), 4 h ( n  = 6) et 6 h ( n  = 6) puis preleves. Une quantification de l’expression proteique d’Hypoxia Inductible Factor-1a (HIF-1a, du Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF), de l’endotheliale Nitric Oxide Synthase total et phophorylated Ser1177 (eNOS et Ser1177-eNOS) a ete faite en Western-Blot. Une quantification de l’expression en ARN des cellules corticales renale de EPO, VEGF et HO-1 a ete faites par RT-PCR. Les concentrations plasmatique de Nitrique oxide (NO) ont ete mesurees avant l’ischemie chaude (IC), a 0 h, 1 h, 2 h, 4 h et 6 h de reperfusion. L’analyse statistique a ete realisee par un test de Kruskal-Wallis puis par un test post-hoc de Dunn. Resultats Apres de 2 h de reperfusion des GR par CRN, l’expression en ARN de HIF-1a, VEGF, EPO et HO-1 augmente de maniere significative par rapport au niveau d’expression en fin d’IC pour atteindre un niveau d’expression equivalant a celui de base. Les expressions proteiques de VEGF et HIF-1a suis une cinetique similaire sous CRN. En reponse a la reperfusion on observe une synthese importante de eNOS associee a une augmentation de l’expression proteique de Ser1177-eNOS mise en evidence par l’augmentation du ratio Serine 1177-eNOS/eNOS total. ( p Fig. 1 ). Discussion L’epithelium vasculaire reagit a la sequence d’I/R des 1 h de CRN avec une synthese de NO par la voie de eNOS activee par phosphorylation sur la serine 1177. Cette voie de synthese de NO a un effet protecteur demontre sur la reprise de fonction des GR. De plus on observe une majoration de l’expression d’EPO, VEGF et HO-1. L’up-regulation d’EPO est un element protecteur important dans la reponse cellulaire a une sequence d’I/R. De plus l’up-regulation de HO-1 et VEGF permettrais de limiter l’apoptose induite par l’I/R et d’ameliorer la survie des GR. De plus il existerait une correlation entre l’expression de HO-1 et VEGF et la reprise de fonction des GR. Au totale la prise en charge des DDAC par CRN permet chez ce modele d’activer et de maintenir plusieurs mecanismes protecteurs des cellules renales suite a une sequence d’I/R permettant un reconditionnement des GR potentiels.