兔角膜基质飞秒激光扫描后Ki-67、转化生长因子β2及平滑肌肌动蛋白的表达

目的研究角膜基质飞秒激光扫描后Ki-67、转化生长因子β2及平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达情况，探讨角膜基质内扫描后角膜创伤愈合反应机制。方法20只纯种新西兰大白兔随机编号，35只眼用60kHzIntralase飞秒激光进行角膜基质内扫描（其中5只兔只做右眼），未手术的5只左眼作为正常对照组。激光参数为：点／线间距10μm，扫描直径8．5mm，扫描能量1．3μJ，扫描深度为135μm，不进行角膜边缘切削。术后在30min、1h,2h、1个月和3个月用裂隙灯显微镜观察角膜的透明程度。分别在术后1d．3d、1周、1个月和3个月各取6只术眼的角膜组织，做免疫印迹法蛋白定量检查，各时间点取1只术眼做免疫组织化学检查，分别观察Ki-67、TGF-β2及α-SMA的表达情况。用两组完全随机化设计资料均数的t检验进行统计学处理。结果免疫印迹法蛋白定量及免疫组织化学检查显示：Ki-67在基质扫描后第1天开始表达增加（0．0670±0．0008），扫描后3d达最高峰（0．6923±0．0051），随着时间推移其表达逐渐减少，但直至术后3个月和对照组相比差异均有统计学意义（t=24．12，57．22，43．26，39．78，18．35；P〈0．05）。TGF-β2（t=0．933，0．856，0．934，0．970，1．132）及OL-SMA（t=1．126，1．235，0．993，1．175，1．211）在术后各时间点的表达和对照组相比差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论角膜基质内飞秒激光扫描后Ki-67表达增加，角膜基质细胞活化、增殖；TGF—β2被完整的角膜上皮所屏障，活化和增生的角膜基质细胞没有向肌成纤维母细胞转化，损伤修复愈合过程中无haze形成。