Mélanomes et cellules tumorales circulantes : intérêt de l’EPISPOT PS100

Introduction La detection des cellules tumorales circulantes (CTCs) peut etre importante dans la prise en charge des malades atteints de melanomes metastatiques (MMM). L’objectif de notre travail a ete d’evaluer par une methode innovante (EPIthelial immunoSPOT ou EPISPOT) le nombre de CTCs vivantes dans des MMM et de comparer les resultats obtenus avec ceux de la technique de reference (CellSearch ® ou CS). Patients et methodes Cette etude observationnelle, comparative, monocentrique et prospective a ete realisee chez 35 MMM (stade IV AJCC) et 33 temoins (20 volontaires sains et 13 patients presentant une pathologie dermatologique non tumorale). Le nombre de CTCs chez chaque sujet a ete determine en aveugle a l’aide des deux methodes. Pour chaque prelevement, un controle interne a ete realise avec des cellules provenant de la lignee WM-266-4. Le marqueur proteique retenu pour l’analyse par EPISPOT a ete la proteine S100B. Les immunospots ont ete comptes a l’aide d’un microscope a fluorescence, chacun d’eux correspondant a une CTC viable secretrice de PS100B. Les marqueurs CD146, HMW-MAA, DAPI, CD45 et CD34 ont ete utilises pour definir les CTCs par le systeme CS. Resultats Le systeme CS a permis de detecter au moins 1 CTC chez 31,4 % (11/35) des MMM et au moins 2 CTCs chez 20 % d’entre eux (7/35). La technique EPISPOT a permis de detecter au moins 1 CTC viable chez 51,4 % (18/35) des MMM et au moins 2 CTCs chez 40 % d’entre eux (14/35). Avec un cut-off standard ≥ 2 CTCs, le systeme EPISPOT avait une meilleure sensibilite que le systeme CS ( p  = 0,035). Une mediane de 1 CTC (etendue 0–900) a ete detectee par EPISPOT et de 0 CTC (etendue 0–4937) par le systeme CS dans le groupe MMM. Il n’y avait pas de difference statistiquement significative dans la specificite des deux methodes chez les volontaires sains. Il n’y avait pas de CTC detectee par le systeme CS dans le groupe presentant une pathologie dermatologique benigne ( n  = 13), alors que le pourcentage de CTCs detecte dans ce groupe etait de 41,7 % avec la technique EPISPOT PS100. Discussion La technique EPISPOT a deja ete utilisee pour la detection des CTCs viables dans les cancers du sein, du colon et de la prostate. A notre connaissance, elle n’a jamais ete proposee dans le melanome. Les resultats de notre etude montrent qu’elle a une sensibilite superieure a celle de la methode immunomagnetique de reference. Ces donnees peuvent resulter d’une heterogeneite phenotypique des CTCs. La moins bonne specificite de cette nouvelle technique pourrait etre due a la nature de la proteine etudiee (PS100B). Conclusion Il s’agit de la premiere etude evaluant la technique EPISPOT dans le melanome. L’EPISPOT PS100, basee sur les proprietes fonctionnelles de CTCs viables, a une meilleure sensibilite que celle du systeme immunomagnetique de reference (CS) qui ne repose que sur le phenotype des CTCs. Son utilisation pourrait etre proposee dans la detection des CTCs chez les malades atteints de melanome metastatique.