1,25（OH）2D3诱导实验性自身免疫性重症肌无力大鼠免疫耐受的机制

目的探讨1,25-二羟维生素D3[1,25（OH）2D3]对诱导实验性自身免疫性重症肌无力（EAMG）大鼠产生免疫耐受以及免疫耐受的机制。方法采用人工合成的大鼠来源乙酰胆碱受体α亚基97-116肽段（R97-116）免疫Lewis大鼠制备EAMG模型,随机分为1,25（OH）2D3治疗组（实验组）和对照组。进行临床症状评分、测量体质量,采用流式细胞术检测淋巴结MNC表型（CD80、CD86、MHC-II）和调节性T细胞的比例,采用CCK-8法测定特异性淋巴细胞增殖程度,采用流式细胞术测定细胞周期的分布,采用ELISA法检测淋巴结单核细胞（MNC）培养液中IL-4、IFN-γ、IL-17含量和血清中抗R97-116 IgG水平。结果从首次免疫后28 d开始,实验组临床症状评分显著低于对照组（P〈0.01）。从首次免疫后35 d开始,实验组体质量显著高于对照组（P〈0.01）。实验组淋巴结MNC表面CD80、CD86的表达较对照组显著降低（P〈0.05）。实验组淋巴结MNC中CD4^＋CD25^＋T细胞和CD4^＋FoxP3^＋T细胞的表达显著高于对照组（P〈0.01,P〈0.05）。实验组淋巴结MNC的淋巴细胞增殖反应较对照组显著降低（P〈0.01）。实验组淋巴结S期细胞的百分比显著低于对照组（P〈0.05）,S期和G2/M期细胞的百分比也显著低于对照组（P〈0.05）。实验组R97-116肽激活的淋巴细胞MNC上清液中IL-4水平较对照组显著增高（P〈0.05）,IFN-γ和IL-17水平较对照组显著降低（P〈0.05）。实验组血清中抗R97-116 IgG水平显著低于对照组（P〈0.05）。结论1,25（OH）2D3通过诱导免疫耐受显著地改善EAMG大鼠的临床症状,其免疫耐受机制与降低MNC表面CD80和CD86的表达、上调调节性T细胞数量和Foxp3的表达、抑制淋巴细胞增殖、改变淋巴细胞周期、Th1/Th17型细胞反应向Th2型细胞反应的转化及降低抗R97-116 IgG抗体水平有关。