Identification de biomarqueurs de sévérité hémodynamique de l’hypertension artérielle pulmonaire associée à la sclérodermie systémique par analyse du protéome sérique

Introduction L’objectif de ce travail est d’etudier les alterations du proteome serique des patients atteints d’hypertension arterielle pulmonaire (HTAP) associee a la clerodermie systemique (SSc), d’identifier les proteines correlees a la severite hemodynamique et determiner leur role potentiel dans la physiopathologie de la maladie. Patients et methodes Les patients eligibles ont ete recrutes dans les centres de reference SSc et/ou HTAP de Boston, Lille, Le Kremlin-Bicetre et Grenoble. Les patients etaient inclus s’ils remplissaient les criteres suivants : diagnostic de SSc selon les criteres ACR/EULAR 2013, forme cutanee limitee, pas de pneumopathie interstitielle diffuse (PID) etendue selon les criteres de Goh, et pas de traitement specifique de l’HTAP. Les patients etaient consideres comme des cas s’ils avaient un diagnostic d’HTAP confirme par catheterisme cardiaque droit (KTD) et un echantillon de serum preleve le meme jour que le KTD. Ils etaient consideres comme des temoins s’ils n’avaient aucun signe evocateur d’HTAP a l’echocardiographie. Resultats Dans une premiere etape exploratoire, l’expression serique de 1129 proteines a ete evaluee chez 15 cas et 16 temoins par analyse proteomique a haut debit (SOMAscan). Nous avons identifie 53 proteines exprimees differentiellement entre les 2 groupes. Parmi ces 53 candidats, seules 2 etaient significativement correlees avec les resistances vasculaires pulmonaires (RVP) : chemerine (p = 0,01, ρ = 0,62) et SET nuclear proto-oncogen (SET) (p = 0,01, ρ = 0,62). Pour valider ces resultats, les taux seriques de chemerine et SET ont ete mesures en ELISA chez 25 cas et 19 controles supplementaires. Les dosages de chemerine etaient de nouveau significativement plus eleves chez les cas (p = 0,01) et correles avec les RVP (p = 0,01, ρ=0,46) dans cette cohorte independante. Dans une deuxieme etape, pour etudier le role physiopathologique potentiel de la chemerine, nous avons realise des marquages en immunofluorescence confocale sur des poumons explantes de temoins sains, de patients SSc-PID sans HTAP et de patients SSc-HTAP. Le marquage du recepteur de chemerine, CMKLR1, etaient significativement augmente sur les cellules musculaires lisses d’artere pulmonaire (CML-AP) de patients SSc-PID et de patients SSc-HTAP. Nous avons ensuite teste l’effet de la chemerine sur la proliferation des CML-AP en stimulant les CML-AP de patients presentant une HTAP idiopathique (HTAPi) avec du serum de patients SSc avec et sans HTAP, en presence ou en l’absence d’un inhibiteur de CMKLR1. On confirmait que les CML-AP d’ HTAPi surexprimaient l’ARNm de CMKLR1 par rapport aux temoins sains (p = 0,03). Le serum des patients SSc-HTAP induisait une proliferation de CML-AP significativement plus elevee (p = 0,005) que le serum des temoins. Cette difference n’etait plus significative (p = 0,69) lors de l’ajout de l’inhibiteur CMKLR1 a-NETA. Conclusion La chemerine semble etre un biomarqueur de substitution valide des RVP dans l’HTAP-SSc. L’elevation de la chemerine circulante et la surexpression de son recepteur, CMKLR1, contribuent a la physiopathologie de l’HTAP-SSc en induisant la proliferation des CML-AP.