产肠毒素大肠杆菌FaeG—mSTa—LTb—STb融合表达及其包涵体口服免疫小鼠诱导的免疫应答

为研究产肠毒素大肠杆菌（ETEC）F4菌毛主要结构蛋白FaeG、STa、LTb和STb毒素融合蛋白的免疫原性，本研究采用重叠延伸PCR（SOE-PCR）扩增编码FaeG-mSTa（STa突变体）-LTb—STb4种蛋白融合基因，将其克隆于pProEXHTa表达载体中进行原核表达。并以表达的包涵体口服免疫BALB／c小鼠，通过检测免疫鼠的体液和细胞免疫反应，评价其免疫效果。实验结果显示，融合蛋白在大肠杆菌中以包涵体的形式高效表达，并可以被特异性抗体所识别，具有良好的反应原性。免疫小鼠后均能够产生特异性IgG和sIgA，并诱导产生细胞免疫应答。免疫记忆反应试验证明，免疫鼠至少在3个月内保持对特异性抗原的免疫记忆应答。本研究结果表明，FaeG-mSTa-LTb-STb融合蛋白具有良好的免疫原性，口服包涵体免疫是一种可行的免疫途径，提示所制备的融合蛋白作为口服疫苗抗原具有潜在的应用价值。