Comparación de tres métodos genotípicos para la detección de resistencia del VIH-1 a los antirretrovirales

espanolCon la aparicion de nuevos antirretrovirales ha mejorado considerablemente la expectativa de vida de los pacientes infectados por el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH), pero mutaciones en la region que codifica la transcriptasa inversa (TI) y la proteasa (P) del VIH-1 pueden producir fallos en el tratamiento, por lo cual los estudios de resistencia pueden ser de utilidad para la seleccion del tratamiento mas eficaz. El objetivo de nuestro trabajo ha sido comparar tres metodos genotipicos de deteccion de resistencias para valorar cual puede resultar mas adecuado en el laboratorio. Se han estudiado un total de 90 pacientes tratados con antirretrovirales, mediante tres metodos diferentes: hibridacion reversa que identifica la presencia de virus salvaje o mutante en 19 codones clave para las regiones de transcriptasa inversa y proteasa, InnoLiPA HIV-1 (Line Probe Assay, Innogenetics, Belgica), y dos de secuenciacion, ViroSeq HIV-1 Genotyping System (Perkin Elmer/Applied Biosystems, California) y TrueGene HIV-1 Genotyping System (Visible Genetics, Canada). Se detectaron 408 mutaciones por InnoLiPA, 572 por TrueGene y 721 por ViroSeq. La hibridacion detecto un numero significativamente superior de mutaciones primarias, asociadas con los grados de resistencia mas altos (p EnglishHighly active antiretroviral therapy has dramatically improved the life expectancy of human immunodeficiency virus (HIV)-infected patients, but mutations in the HIV-1 reverse transcriptase (RT) and protease (P) genes confer drug failure. Evaluation of drug resistance genotyping in HIV-1 has proven to be useful for the selection of drug combinations with maximum antiretroviral activity. The aim of this study was to evaluate the optimal procedure to determine the resistance profile in the laboratory. Plasma from 90 antiretroviral-treated patients was analyzed by reverse hybridization, which identifies the presence of wild-types or mutations at the 19 key codons for protease and RT regions, and was compared with two other methods of direct cDNA sequencing. A total of 408 mutations were detected by InnoLiPA HIV-1, (Line Probe Assay, Innogenetics, Belgium), 572 by TrueGene HIV-1 Genotyping System (Visible Genetics, Canada), and 721 by ViroSeq HIV-1 Genotyping System (Perkin Elmer/Applied Biosystems, California). Hybridization detected a significantly higher number of primary mutations which are associated with a high level of drug resistance (p