САМОСИНХРОНИЗАЦИЯ РИТМА СИНТЕЗА БЕЛКА В КУЛЬТУРАХ HACAT КЕРАТИНОЦИТОВ ЧЕЛОВЕКА

В культурах кератиноцитов человека HaCaT, содержащихся в бессывороточной среде на стеклах, обнаружен околочасовой ритм синтеза белка, сходный с ритмом в гепатоцитах in vitro. Интенсивность синтеза определяли по включению 3-лейцина с поправкой на пул свободного меченого лейцина. Ритм изучали в отмытых 1- или 2-суточных культурах после смены среды. Среда, кондиционированная кератиноцитами HaCaT, синхронизировала разреженные несинхронные в контроле культуры гепатоцитов. Следовательно, кератиноциты выделяют в среду синхронизирующие факторы. Хелатор ионов кальция ВАРТА-АМ ликвидирует ритм синтеза белка как в плотных синхронных в контроле культурах гепатоцитов, так и в культурах кератиноцитов HaCaT. Аналогичным был эффект ингибитора протеинкиназ Н7. Таким образом, в кератиноцитах, как и в гепатоцитах, происходит самосинхронизация колебаний интенсивности синтеза белка. Механизм самосинхронизации – кальций-зависимое фосфорилирование клеточных белков.