Microscopia de força atômica no estudo da superfície endotelial de bifurcações arteriais cerebrais humanas

Objetivo: Apresentar o estudo morfologico do endotelio vascular de arterias cerebrais humanas e discutir aplicacoes e limitacoes da miceoscopia de forca atomica (AFM) no estudo de patologia vascular. Material e metodo: Foram utilizadas amostras do segmento M1 e da bifurcacao da arteria cerebral media, com e sem doenca aterosclerotica. Imagens topograficas, obtidas por microscopia eletronica de varredura (MEV) das amostras fixadas quimicamente e desidratadas mediante ponto critico foram confrontadas com imagens de amostras nao fixadas, obtidas por AFM. Resultados: As celulas endoteliais nos segmentos retos de M1 e da bifurcacao da ACM, sem doenca aterosclerotica, sao alongadas e alinhadas com eixo axial do vaso, porem poligonais e sem orientacao preferencial na bifurcacao aterosclerotica.A bifurcacao com aterosclerose apresenta uma monocamada endotelial altamente irregular e corrugada que invagina na luz do vaso e mostra caracteristicas heterogeneas na superficie da membrana. A resolucao das imagens de MEV foi superior aquela obtida nas imagens de AFM a baixa magnificacao. Nas imagens de AFM, a parte lateral e as unioes celulares sao pouco definidas e a varredura em altas magnificacoes diminui a resolucao. Contudo, e possivel determinar a topografia tridimensional da superficie celular, podendo-se, ao mesmo tempo, realizar estudos funcionais. Conclusao: Apesar da combinacao unica de alta resolucao de imagem e operacao sob condicoes proximas as fisiologicas, a AFM em amostras flexiveis apresenta resolucao que depende do tipo de cantilever e do grau de hidratacao da amostra. Por isso, em amostras vasculares as condicoes fisiologicas terao de ser estritamente reproduzidas...