miRNA-486-5p对胃癌细胞SGC7901中NRP2表达的影响

目的：预测并鉴定miRNA-486-5p在人胃癌细胞SGC7901中的靶基因及其表达。方法：采用生物信息学技术预测miRNA-486-5p的作用靶点,构建miRNA-486-5p过表达质粒（GV214-miR）并转染入SGC7901细胞（SGC7901-miR）中,以空质粒转染SGC7901细胞（SGC7901-miR-NC）为阴性对照,以SGC7901细胞为空白对照。Real-time PCR检测转染细胞中miRNA-486-5p及其靶基因神经纤毛蛋白2（neuropilin-2,NRP2）mRNA的表达,Western blotting检测NRP2的表达,双荧光素酶实验验证miRNA-486-5p对NRP2基因的调控机制。结果：经生物信息学预测,选择与胃癌生物学行为密切相关的NRP2作为miRNA-486-5p的靶基因。与空白组相比,GV214-miR转染后的SGC7901细胞miRNA-486-5p表达显著上调[（8.21±1.18）vs（1.02＋0.26）,P〈0.01],NRP2 mRNA表达无明显变化（P〉0.05）,而NRP2蛋白表达则明显下调[（0.36±0.06）vs（0.76±0.05）,P〈0.05],双荧光素酶实验证实miRNA-486-5p可与NRP2 mRNA 3’-UTR直接结合,从而发挥对NRP2转录后翻译的抑制作用。结论：miRNA-486-5p在胃癌细胞SGC7901中可直接作用于NRP2 mRNA 3’UTR,从而抑制其表达。