The Influence of the Carnoy's Pre-fixative Dosage on the Dispersity of Metaphase Chromosome

目的 定量研究Carnoy's预固定剂量变化对外周血淋巴细胞中期染色体分散度的影响.方法 用0.075 moL/L KCl对经培养的外周血淋巴细胞于37℃低渗处理35 min;在预固定环节,Carnoy's液的量分别控制在1.25%、2.50%、3.75%、6.25%和12.25%(终体积浓度);常规制备中期染色体标本,Giemsa染色后观察不同预固定剂量下淋巴细胞及中期染色体的分散质量,计算中期染色体铺展的面积及染色体的分散质量.结果 当预固定剂量占总体积的1.25%、2.50%或3.75%时,染色体的分散质量较好,可用核型多,当预固定剂比例≥6.25%后,细胞间相互黏连的程度和染色体间相互积聚的倾向愈发明显.对染色体铺展面积的定量结果显示,预固定剂比例为1.25%、2.50%和3.75%时,分裂相核型的平均分布面积分别为1 246±236 mm2、1 143±178 mm2和l 017±163 mm2,均显著高于预固定剂用量为6.25%和12.25%时中期分裂相核型的平均分布面积:876±81 mm2和518±65 mm2,双侧t检验显示组间比较差异显著(P＜0.05).结论 在染色体标本制备过程中,预固定剂的用量是最终影响染色体分散质量的重要因素之一。