Metabolismo oxidativo de neutrofilos em polimorfonucleares de caprinos naturalmente parasitados por nematódeos

Foi avaliado o metabolismo oxidativo de neutrofilos em polimorfonucleares de caprinos infestados naturalmente por nematodeos gastrintestinais. Foram utilizados 14 caprinos, do 2° ao 9° mes de idade, sem padrao racial definido, alojados no setor de caprinocultura da Universidade Federal do Reconcavo da Bahia, Cruz das Almas-Ba. Os animais foram submetidos ao regime semiextensivo em uma area de desafio parasitario. As amostras sanguineas foram coletadas em intervalos de quinze dias, no periodo de nove meses. Para a separacao simultânea de mononucleares e polimorfonucleares uma amostra de sangue total em tubos a vacuo contendo heparina foi coletada e centrifugada. A papa de leucocitos e o plasma foram retirados e submetidos aos gradientes descontinuos de densidade e as celulas mono e polimorfonucleares separadas. O anel rico em polimorfonucleares foi separado e submetido a lavagem com tampao fosfato. O sobrenadante foi desprezado e as celulas foram resuspendidas em plasma autologo. Essas celulas foram submetidas ao teste de NBT, onde retirou-se uma aliquota dispensada em microtubo contendo igual volume de NBT reconstituido, denominada prova nao estimulada (NE). Em outro microtubo de NBT foi acrescentado uma aliquota da amostra e outra de estimulante denominada prova estimulada (E). Os dois foram submetidos a incubacao a 37°C e em temperatura ambiente realizando a confeccao de lâminas. Essas foram fixadas e coradas, sendo analisadas em aumento de 1.000x, totalizando a contagem de 100 neutrofilos para cada prova. A media de neutrofilos na prova NE foi de 8.910±2.292,5/μL e na prova E de 6.305±1.585,9/ μL. Para a prova E 8.157±1954,6/μL e NE foi 7.066±1857,6/μL, demonstrando que os animais apresentaram a resposta adequada de acordo com o tipo de prova. Apenas 9% das lâminas da prova NE apresentou mais neutrofilos estimulados que nao estimulados e 21% das lâminas da prova E apresentou mais neutrofilos nao estimulados do que estimulados demonstrando a seguranca do teste quanto a padronizacao da tecnica. Esta apresenta-se superior em relacao ao menor tempo demandado para a leitura das lâminas que foi em media 21,5±15 minutos para NE e 22,5±16 minutos para E. Na tecnica usual com sangue total o tempo medio de leitura apresentou-se duas vezes maior, confirmando a eficiencia da separacao, tornando o teste do NBT para especie caprina mais rapido, ja que estes animais possuem menor numero de neutrofilos comparado a outras especies. Os animais apresentaram leucocitose e eosinofilia, onde a media de leucocitos totais foi de 15.649±2.742 μL, e eosinofilos de 1.417±1.205/ μL, superior aos valores de referencia para especie caprina. Estes resultados eram esperados uma vez que os eosinofilos sao celulas relacionadas com a destruicao de parasitas e, portanto, podem encontrar-se com numero elevados nas parasitoses.