SCN5A基因启动区＋495bp～＋584bp片段的克隆与功能分析

目的 为了研究大鼠心肌SCN5A基因启动区＋495bp-＋584bp区域内的顺式作用元件对转录调控的影响。方法 应用聚合酶链反应扩增大鼠心肌SCN5A基因启动区＋495bp～＋584bp片段，与荧光素酶报告基因载体pGL3-promoter重组，以pGL3-promoter空载体为对照，瞬时转染人胚肾母细胞（HEK293）和小鼠胚胎心肌细胞（H9C2），检测荧光素酶活性。结果 成功构建的pGL3-P1重组载体的荧光素酶活性与pGL3-promoter对照载体相比，在HEK293细胞无明显差别（P〉0．05），在H9C2细胞荧光活性增高（22．5±5．4）倍（P〈0．01）。结论 大鼠心肌SCN5A基因启动区＋495bp～＋584bp区域存在对基因的转录调控活性具有增强作用的组织特异性顺式作用元件。