稻曲病菌 T-DNA 插入突变体 B1464插入位点分析

以稻曲病菌致病力丧失的突变菌株 B1464为材料，对其生物学形态和分子遗传变异进行分析.B1464田间接种表现为不致病，与野生型菌株相比，在营养贫瘠的 MM 培养基上生长速率没有显著差异，而在 PSA 和 TB3培养基中生长速率较慢，并且在 PS 液体培养基中产孢能力下降，同时突变菌株的分生孢子与野生型相比形态和大小均发生变化.Southern 杂交结果显示 T-DNA 在突变菌株 B1464中以单拷贝形式插入，利用 TAIL-PCR 技术扩增得到的紧邻 T-DNA 两侧的侧翼序列在野生型中不相邻，与野生型菌株基因组比对发现突变菌株插入位点处丢失约20 kb 的 DNA 片段.RT-PCR 结果表明突变菌株中 T-DNA 插入位点两侧基因表达量均下调.推断突变菌株 B1464的致病能力丧失可能是由于 T-DNA 的插入导致了染色体重排及破坏了某些基因的正常表达.