Análise da Microbiota Intestinal de ratos, antes e após da retirada da Valva Ileocecal e restabelecimento do trânsito com criação de "Esfíncter Artificial"

Varias tecnicas tem sido empregadas para a criacao de esfincteres artificiais no intestino para controle da velocidade do trânsito intestinal e prevencao de refluxo coloileal. A realizacao de seromiotomias duplas circunferenciais para substituir a valva ileocecal foi realizada por Rena et al. em 20 pacientes e mostrou resultados 5 clinicos satisfatorios. A proposta deste trabalho experimental e analisar, por meio de biologia molecular, a diversidade microbiota da regiao do ileo terminal e do colo proximal de ratos antes e depois da resseccao da valvula ileocecal com a reconstrucao do trânsito com anastomose ileocolica termino-terminal isolada ou associada a criacao de esfincter artificial pela tecnica de Rena. Quatorze ratos foram 10 operados e colhidos conteudo do ileo e do colo processadas como amostras controle. Apos a resseccao da juncao ileocecocolica, o trânsito foi reconstruido com anastomose ileocolica termino-terminal. Em sete animais acrescentou-se a criacao um esfincter artificial a montante da anastomose. Os animais foram assistidos por 20 dias e reoperados para colheita de conteudo intraluminar do ileo e do colo e 15 processamento de novas amostras. Das amostras foi extraido o acido desoxirribonucleico (DNA) para Reacao em Cadeia da Polimerase e Eletroforese em Gel com Gradiente de Desnaturacao (PCR-DGGE). O gel com os padroes de bandas eletroforeticas geradas das amostras de DNA de bacterias totais foram submetidos ao programa BIONUMERICS para analise da similaridade pelo 20 coeficiente de Dice e da diversidade da microbiota pelo Indice de Shannon-Weaver. O dendograma do coeficiente de Dice de todas as amostras nao estabeleceu correlacao para segmentos ileais ou colonicos e as amostras-controle dos respectivos animais. Os valores do indice de Shannon-Weaver ficou limitado entre 2,11 e 2,93, com variacoes para os diversos segmentos nos dois grupos. A media 25 deste indice foi maior no segmento ileal (2,61) e do colo (2,57) dos animais com a criacao do esfincter artificial e do colo (2,63) nos animais sem criacao de esfincter artificial em relacao a amostra controle (2,38, 2,39 e 2,36, respectivamente). Um numero maior de amostras ileais apresentou valores mais elevados comparativamente com amostras do colo a despeito do fato de a concentracao 30 microbiana ser descrita e considerada maior no colo. A ausencia da juncao ileocecal influenciou as variacoes da diversidade em todos os segmentos. Com a criacao de novo esfincter a diversidade aumentou nos segmentos tanto ileal quanto do colo. As variacoes encontradas podem se justificar em funcao de o comportamento da distribuicao da microbiota no trato digestorio ter caracteristicas peculiares e receber influencia de fatores locais e sistemicos determinando a continuidade do presente estudo em relacao a quantificacao e especificidade de bacterias.