兔脂肪间充质干细胞的培养鉴定及体外磁标记 MR 成像

目的研究兔脂肪间充质干细胞（adipose derived stem cells，ADSCs）的培养鉴定方法，联合应用超顺磁性氧化铁（superparamagnetic iron oxide particles，SPIO）和多聚赖氨酸（poly—l—lysine，PLL）行体外磁标记细胞，探讨磁标记示踪的可行性。方法分离、纯化并培养兔ADSCs，流式细胞术鉴定细胞表面抗原CD90、CIM4和CD34。应用SPIO—PLL标记细胞，普鲁士蓝染色和透射电镜检测胞内铁粒子。体外3．0TMR分别对1×107个未标记ADSCs（空白对照），经25、50、75μg／mLSPIO—PLL分别标记的1×107个细胞，经25μg／mLSPIO—PLL标记的1×107个（标记1d）、1×107个（标记3d）和5×106个（标记1d）ADSCs进行成像，包括T1WI、T2WI及T2WI序列，测量各组的信号强度和弛豫时间。结果第3代ADSCs纯度高、排列规则，细胞呈漩涡状，流式细胞术检测结果示CD44和CD90阳性表达率分别为99．2％、98．7％，CD34表达阴性。普鲁士蓝染色和透射电镜示胞浆内蓝色颗粒，磁标记率近100％。MR示随着SPIO-PLL浓度增高，T2WI和T2WI序列的信号强度变化较T1WI明显。1×107个ADSCs（标记1d）的信号强度变化率较1×107个（标记3d）和5×105个（标记1d）大，E和．r2弛豫时间与T。弛豫时间相比差异均有统计学意义（F=161．47，P〈0．05），但T2和T2弛豫时间相比差异无统计学意义（F=5．88，P〉0．05）。结论通过分离纯化培养可获得足量的ADSCs，SPIO-PLL能够有效标记ADSCs，体外可行MR细胞成像，以T2WI和T2WI序列敏感。