农杆菌介导LJAMP2基因导入‘红阳’猕猴桃及分子鉴定

为了获得抗溃疡病的‘红阳’猕猴桃转基因植株，以红阳猕猴桃试管苗叶盘为转基因受体材料，通过根癌农杆菌介导将CaMV35S启动子调控下的LJAMP2基因导入红阳猕猴桃。450个叶盘与携带表达载体质粒pBI121的根癌农杆菌菌珠LBA4404共培养2d后，转入含25mg／LKan的筛选培养基培养40d，15d转接1次，之后30d继代1次。结果表明，在MS＋3．0mg／LBA＋1．0mg／LNAA筛选培养基中，Kanf芽率达85％以上，在1／2MS＋0．8mg／LIBA培养基中，Kanr芽生根率达100％。共获得Kanf再生植株40株，经GUS组织染色和PCR分析证明，其中23株为转基因植株。阳性率为57．50％，转化率达5．11％。抗溃疡病基因LJAMP2已成功导入红阳猕猴桃，为红阳猕猴桃的抗病基因工程育种奠定了基础。