Bmi-1 shRNA对膀胱癌5637细胞的侵袭和转移抑制及其机制
2010
目的:探讨特异性抑制Bmi-1基因表达对膀胱癌5637细胞侵袭和转移的影响。方法:将Bmi-1短发夹RNA(shRNA)真核表达载体、脂质体转染膀胱癌5637细胞。Transwell侵袭实验和细胞划痕实验观察Bmi-1 shRNA对膀胱癌5637细胞侵袭和转移的影响。RT-PCR方法检测Bmi-1 shRNA对基质金属蛋白酶-2(MMP-2)mRNA表达的影响。蛋白质印迹法检测Bmi-1 shRNA对E-cadherin和α-平滑肌肌动蛋白(-αSMA)表达的影响。结果:Transwell侵袭实验结果显示,实验组细胞的穿膜细胞数为78.0±5.8,空质粒组为158.0±6.7,未转染组为153.0±4.6。细胞划痕实验结果显示,实验组细胞迁移能力明显降低,P〈0.05。RT-PCR结果显示,与不加转化生长因子-β(TGF-β1)组相比,TGF-β1作用后,未转染组和空质粒组中MMP-2表达明显升高,P〈0.05。蛋白质印迹结果显示,与不加TGF-β1组相比,TGF-β1作用后,未转染组和空质粒组中E-cadherin表达明显降低,α-SMA表达明显升高,P〈0.05。结论:Bmi-1 shRNA可以抑制膀胱癌5637细胞侵袭和转移,其机制是通过阻断TGF-β1促进肿瘤细胞侵袭和转移作用完成的。
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