Reconstruction of liver organoid using a bioreactor

瞄准：用一个简历人工的肝为肝机关在试管内的重建开发有效技术。方法：我们以前报导一个光线流动的生物反应器(RFB ) 能提供一个三维的高密度的文化系统。我们目前重建了和老鼠把一根功能的人的肝细胞癌房间线(FLC-5 ) 用作 hepatocytes 的肝或硬鳞鱼使房间(秒) 线 M1 和老鼠使不朽的正弦曲线内皮不朽肝的星形的房间(HSC ) 在 RFB 作为非实质的的房间衬里 A7。二 x 10 (7 ) FLC-5 房间在 RFB 被孵化。在 5 d 以后， 2 x 10 (7 ) A7 房间以 10 的另一增加(7 ) 跟随的一种类似的方式被增加 M1 房间 5 d 以后。在三天灌注以后，有支持者房间的一些纤维素祷告被收获。最后潜伏期与支持者房间一起为 2 h 然后留下的纤维素祷告与 200 nmol/L swinholide A 包括了灌注从 RFB 被收获。房间形态学被传播电子显微镜学(TEM ) 和扫描电子显微镜学(SEM ) 观察。估计 hepatocyte 功能，我们在 RFB 单个类型的文化和 cocultures 与那些相比在单层文化由 FLC-5 为脲周期酶以及白朊合成比较了 mRNA 表示。结果：由传播电子显微镜学， FLC-5， M1，和 A7 在一个像肝的组织在与灌注方面的关系被安排。类似于胆汁 canaliculi 的结构在 FCL-5 房间之间被看见。扫描电子显微镜学在秒表面上表明了窗。当我们介绍了肌动朊绑定代理人 swinholide 时， vesiculo-vacuolar 细胞器(VVO ) 和窗的数字增加了 -- 在为 2h 的 RFB 的 A。关于肝功能，脲在编码 arginosuccinate 合成酶的 mRNAs 的媒介，和表达式被发现，当三种房间类型是在 RFB 的 cocultured 时，精氨酸酶增加了。然而，白朊合成减少了。结论：在 RFB 系统罐头的合作文化戏剧性地改变所有房间类型的结构和功能，包括 hepatocytes 的功能的特征。我们的系统用一个简历人工的肝为一个肝或硬鳞鱼的重建证明有效。