Étude du métabolisme de xénobiotiques inconnus par spectrométrie de masse hybride « quadripôle-temps de vol » : à propos de la méthoxyisoflavone

Resume Objectif La methoxyisoflavone (5-methyl-7-methoxyisoflanone) est une isoflavone de synthese employee pour ses proprietes anabolisantes par les culturistes. L’implication des metabolites de cette molecule dans des reactions croisees avec les anticorps diriges contre le 11-nor-9-carboxy-?9-tetrahydrocannabinol (THC-COOH) des tests de depistage urinaire des cannabinoides a ete precedemment demontree. Un premier metabolite – la 5-methyl-7-hydroxyisoflavone – a ete identifie par chromatographie en phase gazeuse couplee a un spectrometre de masse (GC/MS). Dans cette etude, les metabolites urinaires de la methoxyisoflavone sont recherches par chromatographie liquide haute performance couplee a un spectrometre de masse hybride quadripole-temps de vol (UPLC-Q-TOF). Methodes Les echantillons d’urine proviennent de trois volontaires sains inclus dans un essai d’administration de la methoxyisoflavone. Apres hydrolyse enzymatique et extraction liquide-liquide, ces echantillons sont analyses par UPLC-Q-TOF (Waters ® , XEVO-G2-Q-TOF) a l’aide d’une source d’ionisation par electronebulisation (ESI) en mode positif. Les spectres sont acquis en mode MS E . Resultats Deux voies de metabolisation et cinq metabolites de la methoxyisoflavone ont ete identifies, selon que la mono- et la dihydroxylation du cycle B sont precedees ou non d’une O-demethylation. Les spectres de masse MS E de la methoxyisoflavone et des metabolites detectes traduisent la perte de fragments neutres CO et H 2 O et, pour les molecules methoxylees, du radical CH 3 • caracteristique des flavonoides. Une double perte de CO et une fragmentation de type retro Diels-Alder selon les liaisons 1 et 3, specifiques des isoflavones, sont systematiquement observees. Conclusion L’UPLC-Q-TOF employee en mode MS E , de part sa sensibilite et la mesure de la « masse exacte », constitue un outil puissant pour la determination du metabolisme de xenobiotiques inconnus tels que la methoxyisoflavone, a partir d’echantillons d’urine et en l’absence de molecules de reference.