非洲爪蟾β-synuclein基因的克隆、亚细胞定位及原位表达检测

目的克隆非洲爪蟾β突触核蛋白基因（xenopus-β-synuclein,xSYNB）并研究其亚细胞定位。方法以成年爪蟾脑部的总RNA为模板,RT-PCR扩增获得xSYNB基因,并克隆入pGEM-TEasy载体而获得TA-xSYNB重组质粒,亚克隆到pEGFPN1载体上获得pEGFPN1-xSYNB真核表达载体。将pEGFPN1-xSYNB重组质粒转染HEK293细胞,用TA-xSYNB重组质粒为模板合成的正义与反义探针对非洲爪蟾胚胎进行原位杂交。结果成功构建了pEGFPN1-xSYNB重组质粒,绿色荧光检测结果发现xSYNB蛋白在细胞浆中表达。原位杂交实验表明xSYNB基因主要表达于胚胎的头部。结论首次鉴定了非洲爪蟾β-synuclein基因的表达,并发现xSYNB基因可能在爪蟾胚胎神经系统发育中起一定作用。