Ensayos de alto rendimiento utilizados en farmacognosia: Selección, optimización y validación de métodos de inhibición enzimática por espectrofotometría UV-visible (High-throughput screening assay used in pharmacognosy: Selection, optimization and validation of methods of enzymatic inhibition by UV-visible spectrophotometry)

Resumen In research laboratories of both organic synthesis and extraction of natural products, every day a lot of products that can potentially introduce some biological activity are obtained. Therefore it is necessary to have in vitro assays, which provide reliable information for further evaluation in in vivo systems. From this point of view, in recent years has intensified the use of high-throughput screening assays. Such trials should be optimized and validated for accurate and precise results, i.e. reliable. The present review addresses the steps needed to develop and validate bioanalytical methods, emphasizing UV-Visible spectrophotometry as detection system. Particularly focuses on the selection of the method, the optimization to determine the best experimental conditions, validation, implementation of optimized and validated method to real samples, and finally maintenance and possible transfer it to a new laboratory. En los laboratorios de investigacion, tanto de sintesis organica como de extraccion de productos naturales, diariamente se obtienen una gran cantidad de productos que potencialmente pueden presentar alguna actividad biologica. Por esta razon es necesario contar con ensayos in vitro que proporcionen informacion confiable para continuar la evaluacion en sistemas in vivo. Desde este punto de vista, durante los ultimos anos se ha intensificado el uso de ensayos de alto rendimiento. Dichos ensayos deben ser optimizados y validados para obtener resultados exactos y precisos, es decir confiables. En la presente revision se abordan las etapas necesarias para desarrollar y validar metodos bioanaliticos, haciendo enfasis en la espectrofotometria Ultravioleta-Visible como sistema de deteccion. Particularmente se enfoca en la seleccion del metodo, la optimizacion para determinar las mejores condiciones experimentales, la validacion, la aplicacion del metodo optimizado y validado a muestras reales y, por ultimo, el mantenimiento y posible transferencia de este a un nuevo laboratorio.