Interferencia de pigmentos vegetales al aplicar la técnica XTT a extractos de Buddleja globosa, Senecio tephrosiodes Turcz. Y Equisetum giganteum

La tecnica XTT se utiliza frecuentemente para determinar la inhibicion o estimulo del crecimiento celular, en la busquedade principios activos antitumorales o de sustancias utilizadas para lograr la expansion celular, por ejemplo, de las celulas madre. Cuando se aplica esta tecnica para la extraccion de metabolitos secundarios de plantas, los pigmentos interfieren en el proceso con resultados indeseables que conducen a errores. El objetivo de este trabajo es observar la presencia de pigmentos en los extractos de las plantas Buddleja globosa (matico), Senecio tephrosioides Turcz (huamanripa) y Equisetum giganteum (cola de caballo), obtenidos con distintos solventes y observados a 450 nm de longitud de onda indicada por la tecnica XTT.Se usaron diferentes solventes para la obtencion de extractos: n-hexano, cloroformo, metanol y agua. El procedimiento experimental consistio en sembrar celulas madre mesenquimales de cuarto pasaje a una concentracion de 5 x 103 celulas/pocillo en una placa de 96 pocillos, y se anadieron extractos y suero fetal bovino (SFB), segun correspondiera. Los cultivos se incubaron durante 24 y 48 horas. Las lecturas se realizaron en un lector de microplacas a 450 nm de longitud deonda. Se aplicaron los procedimientos estadisticos test de Dunnet, ANOVA y la prueba t-Student. La diferenciacionrequiere valores de p < 0.05. Los resultados obtenidos se resumen en las 8 figuras del presente trabajo en las que se observan los valores de densidad optica (DO) obtenidos de las lecturas del cultivo de celulas madre  madre mesenquimales incubadas con diferentes concentraciones de extractos (10, 20, 40, 80, 160, 320, 640 y 1280 μg/ml) para las tres plantas estudiadas. Estos resultados muestran que, en muchos casos, existen residuos de pigmentos de las tres plantas hasta en la ultima etapa del proceso. Los extractos metanolicos del control positivo (CP) Bidens pilosa incubados durante 24 y 48 horas presentaron siempre diferencias significativas con el blanco. No asi los extractos de las plantas medicinales en estudio, solo lo hizo el extracto metanolico de Buddleja globosa a altas concentraciones (320, 640 y 1280mg/ml). Se observa que, en general, los valores en DO obtenidos son mas elevados en casi todas las muestras incubadas durante 48 horas que las que fueron incubadas durante 24 horas. Las lecturas espectrofotometricas de los extractos nos indican una zona libre de los pigmentos mas comunes, que podria ser utilizada para el desarrollo de nuevas tecnicas que permitan la evaluacion de metabolitos secundarios con efecto expansivo o antitumoral en diversas plantas medicinales. La zona va de 574 a 586 nm.