The effect of formaldehyde-fixation on the amount of ultraviolet absorbing substances released from tissue sections in the histochemical ribonuclease test

1. Frisches und gefriergetrocknetes Rattenpankreas wurde entweder in gepuffertem 10%igen Formaldehyd oder in Carnoy-Losung fixiert. Auserdem wurden Schnitte von dem Material, das in Carnoy-Losung fixiert war, mit Formaldehydlosung behandelt. Nach vollstandiger Spaltung mit Ribonuklease wurden die Reaktionsflussigkeiten im ultravioletten Licht spektrometrisch analysiert, und die Komponenten, die bei 260 mμ absorbierten, mit Hilfe von Papierchromatographie qualitativ charakterisiert. Die Vollstandigkeit der Spaltung wurde durch weitere Extraktionen mit N Uberchlorsaure gepruft. Saurelosliche Nukleotide wurden durch kalte 5%ige Uberchlorsaure entfernt. 2. Nur etwa 60% der ultraviolettabsorbierenden Substanzen, die von den Carnoy-fixierten Schnitten freigesetzt wurden, waren in den Reaktionsflussig-keiten der Schnitte, die mit Formaldehyd behandelt waren, oder die von frisch formaldehydfixiertem Material herstammten, nachzuweisen. Es konnte gezeigt werden, das das Formaldehyd 40% der ultraviolettabsorbierenden Substanzen aus dem Carnoy-fixierten Material extrahierte, und das diese den saureloslichen Nukleotiden der Schnitte entsprachen. Die Ribonukleaseverdauung ist also nach beiden Fixierungsarten vollstandig, und die erwahnte Diskrepanz beruht auf dem niedrigeren Gehalt an Nucleotiden in den mit Formaldehyd fixierten Schnitten. 3. Die Frage nach dem Ursprung des saureloslichen Materials in den Carnoyfixierten Schnitten wird unter besonderer Berucksichtigung der Angaben im neueren Schrifttum diskutiert.