Identificación de fracciones electroforéticas de unión a IgE en extractos de Ascaris sp.

Introduccion: Ascaris lumbricoides infecta a una cuarta parte de la poblacion mundial, constituyendose en un problema de salud publica. La ascariosis humana esta asociada con morbilidad cronica y aguda, especialmente en ninos. Recientemente se ha planteado la existencia de anticuerpos IgE en el suero sanguineo de pacientes alergicos, que tienen reaccion cruzada con alergenos de artropodos domesticos y antigenos de Ascaris sp., esto podria aumentar el numero de muestras seropositivas a Ascaris sp, en poblaciones sensibilizadas a los acaros del polvo intradomiciliario. Objetivo: Producir extractos de cuerpo entero de A. lumbricoides y A. suum, evaluar sus propiedades antigenicas y capacidad de union a la IgE de pacientes alergicos al acaro Dermatophagoides pteronyssinus. Metodos: Los extractos fueron obtenidos por homogenizacion y lisis osmotica de las celulas en presencia de Tween-20 e inhibidores de proteasas. El perfil de proteinas de cada extracto fue identificado por electroforesis en geles de poliacrilamida con dodecilsulfato sodico (SDS-PAGE). La reactividad antigenica se determino por Western blotting usando once sueros de pacientes alergicos con diagnostico de asma. Resultados: SDS-PAGE revelo 20 fracciones electroforeticas mayoritarias (20-200 kDa). Western Blotting revelo diferencias en el perfil de proteinas de union a la inmunoglobulina IgE de los extractos. Conclusiones: Proteinas del cuerpo entero de A. lumbricoides y A. suum mostraron un perfil de union a IgE diferente en el Western blotting, con sueros de pacientes alergicos al acaro D. pteronyssinus, sugiriendo la presencia de marcadores especie especificos entre los dos parasitos, los cuales podrian usarse en futuras investigaciones biomedicas.(AU) Background: Ascaris lumbricoides infects a quarter of the world's population, thus becoming a public health problem. Human ascariasis is associated with chronic and acute morbidity, especially in children. Recently, it has been stated that the existence of IgE antibodies in the blood serum of allergic patients that have cross reactivity with domestic arthropods and antigens of Ascaris sp. could increase the number of samples seropositive for Ascaris sp. in populations who are sensitized to house dust mites. Objective: To produce whole body extracts of both A. lumbricoides and A. suum, and to evaluate their antigenic properties and the IgE-binding capacity in patients allergic to the house dust mite (Dermatophagoides pteronyssinus). Methods: The extracts were obtained by homogenization and osmotic lysis in the presence of Tween-20 and protease inhibitors. The protein profile of each extract was identified by sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel elctrophoresis (SDS-PAGE). Antigen reactivity was determined by Western blotting, using eleven sera from allergic patients with the diagnosis of asthma. Results: SDS-PAGE revealed 20 major electrophoretic fractions (20-200 kDa). Western Blotting revealed differences in the protein profile of the immunologlobulin IgE-binding of the extracts. Conclusions: Whole body proteins of both A. lumbricoides and A. suum showed a different IgE-binding profile in the Western blotting, with sera from patients allergic to the D. pteronyssinus mite, suggesting the presence of species-specific markers between the two parasites, which could be used in further biomedical research.(AU)