抗栓肽和尿激酶原（B链）嵌合体的构建与表达

通过基因工程重组技术，将抗栓肽(decorsin)基因与尿激酶的B链即scu-PA(B)基因用柔性Linker((Gly4ser)3)融合在一起，构建新的嵌合体基因dscuPA(B)，在大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS中通过IPTG诱导表达，并考察了重组质粒在Rosetta(DE3)plyss在传代中的分离稳定性。该融合蛋白在大肠杆菌中是以包涵体的形式存在，对包涵体进行变性及复性后，并通过Zn^2+螯合柱和SP阳离子交换柱进行纯化。质谱分析表明分子量为33．735kD，与理论值相符。目的蛋白质的纯度可达90％。纤维蛋白平板法测得嵌合分子的比活为90000IU／mg，与scuPA-32k的比活相近。体外血小板聚集实验表明融合蛋白有较强的抑制血小板聚集的功能，抑制常数IC50为0．31μmol/L。以上这些结果表明，该融合蛋白不但具有较强的溶栓功能，而且具有抗栓功能，可能是一种具有很好发展前景的双功能溶栓抗栓药物。