^99Tc^m—His10—Annexin V探测非小细胞肺癌细胞凋亡的实验研究

目的探讨^99Tc^m标记带有10个连续组氨酸的膜联蛋白Ⅴ（His10-Annexin Ⅴ）探测荷非小细胞肺癌（NSCLC）裸小鼠模型化疗后肿瘤细胞凋亡的可行性。方法用^99Tc^m直接标记His10-Annexin Ⅴ。荷H460 NSCLC肿瘤裸小鼠模型20只，按体表面积以100mg／m^2剂量紫杉醇化疗诱导，分成未治疗（对照）、化疗诱导后24，48，72h共4组.^99Tc^m-His10-AnnexinⅤ显像探测化疗前后肿瘤组织细胞凋亡，计算肿瘤／对侧正常肌肉组织放射性比值（T／NT），测定每克组织百分注射剂量率（％ID／g）。以^99Tc^m-IgG显像为对照，确定肿瘤的非特异性摄取。用流式细胞术（FCM）测定肿瘤组织活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶（Caspase-3），光学显微镜HE及原位末端标记法（TUNEL）染色测定凋亡指数。采用SPSS12．0软件进行统计学处理，运用单因素方差分析和直线相关分析（Pearson）。结果”^99Tc^m -His10-Annexin Ⅴ放化纯为（98．01±1．67）％。注射^99Tc^m- His10-Annexin Ⅴ后2h即可得到清晰图像，化疗诱导组肿瘤部位可见明显的放射性浓聚，化疗后24，48，72h组的T／NT值分别为2．63±0．76，3．41±0．90，3．85±0．62；对照组T／NT值为1．42±0．19，F值分别为12．064，23．322，70．177，P均〈0．01。未治疗组肿瘤仅有少量放射性摄取，为（1．09±0．18）％ID／g，化疗后肿瘤摄取明显增加，24，48，72h肿瘤摄取分别为（2．55±0．73）、（3．60±1．09）、（3．73±0．97）％ID／g，明显高于未治疗组（F值分别为18．733，20．624，35．626，P均〈0．01）。^99Tc^m-IgG显像化疗组及对照组肿瘤均未见明显放射性浓聚。未治疗组活化Caspase-3为（3．70±0．74）％，化疗后24，48，72h分别为（23．46±2．23）％、（62．85±6．13）％、（70．44±6．09）％，3个化疗诱导组和未治疗组相比差异均有统计学意义（F值分别为354．610，459．438，591．052�