CARACTERIZAÇÃO CELULAR DA HEMOLINFA DE FÊMEAS INGURGITADAS DE Amblyomma sculptum

O carrapato Ambyomma sculptum, encontrado as varias regioes do Brasil, e conhecido como “carrapato estrela” ou “carrapato do cavalo” e parasita animais domesticos, silvestres e humanos, sendo o principal transmissor de Rickettsia rickettsii , agente etiologico da Febre Maculosa Brasileira. Possui grande importância veterinaria por causar diversos prejuizos aos seus hospedeiros. Estudos sobre sistema imunologico de carrapatos buscam avaliar alteracoes na resposta celular hemolinfatica que faca entender a imunologia e fisiologia envolvida nos mecanismos de controle e resistencia. O objetivo deste trabalho foi caracterizar quantitativamente e morfologicamente os hemocitos da hemolinfa de femeas ingurgitadas de A. sculptum. A hemolinfa foi coletada por uma perfuracao da cuticula na parte dorsal do carrapato e depositada em lâmina de vidro para confeccao dos esfregacos que foram corados por solucao de Giemsa. Foi realizada a contagem diferencial de hemocitos com base na morfologia observada em microscopio optico em aumento de 1000 vezes, atraves da identificacao das 100 primeiras celulas encontradas. A avaliacao dos tamanhos de cada celula e de seus componentes foi realizada por leitura das lâminas confeccionadas para contagem diferencial dos hemocitos com o auxilio de um microscopio optico com luz polarizada. A contagem total de hemocitos foi realizada com auxilio de microscopio optico e Câmara de Neubauer. A caracterizacao celular revelou que o carrapato A. sculptum apresenta media de 1024 cels/μL e seis tipos celulares que se distribuem de forma distinta na hemolinfa. Os granulocitos foram os hemocitos mais frequentes (78%), seguidos de plasmatocitos (10%), prohemocitos (6%), esferulocitos (5%), oenocitoide (1%) e adipohemocito com menos de 1% de frequencia. De acordo com as caracteristicas morfologicas os granulocitos foram descritos com tamanho medio de 22x19 μm, sendo celulas de tamanhos variados e de formas arredondadas a elipticas, com citoplasma coberto de grânulos. Os plasmatocitos se apresentaram polimorficos com citoplasma vacuolizado ou granular e foi o grupo com maior variacao de forma e tamanho com medidas medias de 24x10 μm. Os prohemocitos foram o menor tipo celular observado medindo em media 13x11 μm, se apresentando em formato arredondado, com nucleo central e escasso citoplasma. Os esferulocitos caracterizaram-se como celulas arredondadas (tamanho medio de 22x20μm) com estruturas presentes de forma abundante no citoplasma, as esferulas. Os oenocitoides apresentaram tamanho intermediario (media: 23x19μm), com forma arredondada, margens irregulares e citoplasma com granulacoes refrateis e aspecto esponjoso. Os adipohemocitos, raramente encontrados, sao celulas de tamanho variavel, margens citoplasmaticas irregulares, vesiculas refringentes no citoplasma e a quantidade observada nao foi suficiente para realizacao da conferencia das medidas com seguranca estatistica. Conclui-se que a partir da microscopia optica foi possivel determinar o valor medio do total de hemocitos circulantes, classificados morfologicamente como granulocitos, plasmatocitos, prohemocitos, esferulocitos, oenocitoides e adipohemocitos, e determinar a frequencia media de cada hemocito na hemolinfa de A. sculptum, onde os granulocitos sao o tipo mais frequentes.