Recherche et dosage de sulfamides hypoglycémiants dans le plasma humain par CLHPSM/SM à trappe d'ions : validation et application au dépistage des hypoglycémies factices

Devant un tableau clinique d'hypoglycemie inexpliquee, il est essentiel de rechercher la possibilite d'une intoxication par les sulfamides hypoglycemiants. A ce jour, le diagnostic definitif ne peut souvent se faire que par l'identification de ces molecules dans le sang. Nous proposons une methode par CLHP-SM/SM a trappe d'ions permettant d'identifier et de quantifier 6 sulfamides hypoglycemiants (glibenclamide, glibornuride, glicazide, glimepiride, glipizide, carbutamide) dans le plasma humain. Apres extraction en phase liquide de l'echantillon (500 L) par l'ether en milieu acide, en utilisant le glisoxepide comme etalon interne, la separation chromatographique s'effectue en 8 min, sur colonne Hypurity (C18, 5m, 150 x 2,1mm .i.d.) a l'aide du melange acetonitrile/acide formique 0,1%, 50/50 v/v delivre en mode isocratique. La detection est assuree par un detecteur SM/SM a trappe d'ions en mode d'ionisation electrospray positif. L'identification de la ou des molecule(s) incriminee(s) est realisee par comparaison des spectres obtenus en mode “ scan complet SM/SM ” avec les spectres de references enregistres dans une bibliotheque spectrale realisee au labo-ratoire. La determination des concentrations plasmatiques est effectuee au moyen de gammes etalons preparees dans les memes conditions. La methode a ete validee pour des domaines de linearite, variables selon la molecule (r 2 > 0,99). Le defaut de justesse et la fidelite determines pour chaque molecule et a differentes concentrations sont inferieurs a 15%, excepte aux limites de quantification de certains composes au niveau desquelles ces valeurs peuvent atteindre 18%. Les coefficients d'extraction obtenus dans le plasma sont compris entre 63% et 87%, sauf pour le carbu-tamide (< 45%). L'effet de suppression d'ions ne survient pas aux temps de retention des composes d'interet. Cette metho-de, rapide et specifique, est bien adaptee a l'identification et la quantification dans le plasma de sulfamides hypoglyce-miants, dans un contexte d'hypoglycemie "factices".