AN. Produção de lipase de Aspergillus em meios de cultivo com diferentes óleos

Introducao: A busca por novos microrganismos que possam ser utilizados para producao de bioprodutos em processos biotecnologicos vem crescendo nos ultimos tempos e a producao de enzimas microbianas atraves desse processo desperta interesse em aplicacoes industriais. Objetivo: Avaliacao da atividade hidrolitica de lipases de diferentes cepas de Aspergillus e aplicacao na producao de lipases em meios de cultivo utilizando diferentes oleos. Metodologia: A producao de lipase foi realizada por cultivo submerso em frascos erlenmeyers (250 mL) contendo 50mL do meio de cultivo composto de: 20,0 g/L de peptona bacteriologica, 8,0 mL/L de oleo de azeite, 0,6 g/mL de MgSO 4 .7H 2 O, 1,0 g/L de KH 2 PO 4 , 1,0 g/L de NH 4 NO 3 . Foram adicionados 5 discos de micelio, retirados das placas de Petri com meio BDA, previamente inoculadas e mantidas por 7 dias a 30°C. A producao foi conduzida em agitador orbital, por 36 horas (30°C, 150rpm). Ao final de 3 dias, os meios de cultivo foram filtrados a vacuo e o filtrado foi utilizado na dosagem das atividades enzimaticas. Foram avaliadas duas cepas: A. japonicus e A. oryzae, cedidas da colecao de cultura DPUA, do laboratorio de Micologia da Universidade Federal do Amazonas. Na etapa posterior, a cepa selecionada foi utilizada na producao de lipase empregando-se diferentes oleos (soja, uva, algodao e Tween 80). A atividade hidrolitica foi quantificada pelo metodo de titulacao de acidos graxos formados pela hidrolise de triglicerideos. Resultados e discussao: A cepa que apresentou producao de lipases com maior atividade hidrolitica foi a de A. japonicus, fornecendo atividade hidrolitica de 32,96 U/mL, valor 5,3 vezes superior a atividade fornecida pelo A. oryzae. Assim, a cepa de A. japonicus foi selecionada para a etapa posterior de producao de lipases em meios com diferentes oleos. As atividades enzimaticas obtidas foram 32,96, 17,45, 30,92, 41,04 e 23,00 U/mL nos oleos de azeite, algodao, uva, soja e no Tween 80, respectivamente. O melhor resultado foi obtido empregando-se oleo de soja no meio de cultivo. No entanto, considerando os calculos de intervalo de confianca a 95%, os resultados mostraram que a atividade da lipase produzida com oleo de uva (30,92 [33,67-23,17] U/mL) apresentou atividade hidrolitica igual ao do azeite (32,96 [34,33-31,59] U/mL). Salienta-se que, empregar o oleo de uva na producao de lipases e uma alternativa interessante pois trata-se de um oleo de origem alternativa, sendo obtido de residuos gerados pela industria do vinho. Conclusao: Embora a atividade enzimatica da lipase produzida com meio contendo oleo de soja tenha sido mais elevada, o oleo de uva se mostrou bastante eficiente. Considerando-se que o Brasil e um pais de grande atividade agricola, com geracao de expressivas quantidades de residuos industriais, o uso do oleo de semente de uva para producao de lipases apresenta-se como alternativa viavel e promissora.