Atividades e expressão de peptidases em ratos tratados cronicamente com L-NAME, um inibidor da biossintese de oxido nitrico, e em ratos espontaneamente hipertensos

As peptidases desempenham um papel importante na modulacao da atividade de peptideos endogenos em situacoes normais e patologicas. Neste trabalho, investigamos a atividade e expressao de quatro peptidases (aminopeptidase M- APM, dipeptidil peptidase IV - DPP IV, endopeptidase neutra - NEP 24.11 e metaloendopeptidase 24.15 - MEP 24.15) em tecidos (aorta, cerebro, coracao, figado, pulmao e rim) de ratos em dois modelos de hipertensao: a hipertensao induzida pelo tratamento cronico de ratos com NliJ-nitro-L-arginina metil ester (L-NAME), um inibidor da biossintese de oxido nitrico (NO), e em ratos espontaneamente hipertensos (SHR). A atividade enzimatica foi avaliada por ensaios enzimaticos fluorometricos ou colorimetricos enquanto a expressao foi avaliadapor westernblotting.Em ratos tratadoscom L-NAME(80 mg kg-1day-1, p.o., durante 4 semanas), nao houve alteracao na atividade das quatro peptidases estudas em cerebro, coracao, figado, pulmao e rim (a NEP 24.11 foi detectada apenas no pulmao e rim). Entretanto, na aorta toracica, a atividade da APM mostrou um pequeno decrescimo enquanto as atividades da DPP IV e MEP 24.15 foram significativamente aumentadas. A expressao de DPP IV e MEP 24.15 tambem foi aumentada pelo tratamento com L-NAME.As atividades da MEP 24.15 recombinante ou DPP IV renal nao foram afetadas pela incubacao com L-NAME (1-100 fJM)ou nitroprussiato de sodio e 3-morfolinosidnonimina (1-100 fJM cada), ambos doadores de NO. A administracao de N-[1-(R,S)-carboxi-3-fenilpropil]-Ala- Aib-Tyr-p-aminobenzoato (JA2), um inibidor de MEP 24.15/MEP 24.16, em ratos anestesiados com pentobarbital sodico aumentou a resposta hipotensora da bradicinina. No modelo SHR, a atividade da DPP IV foi aumentada no cerebro, enquanto que as atividades da MEP 24.15 e NEP 24.11 foram aumentadas no pulmao (MEP 24.15 e NEP 24.11) e rim (NEP 24.11). Por outro lado, as atividades da DPP IV e MEP 24.15 foram reduzidas na aorta toracica; a APM foi inalterada e a NEP 24.11 nao foi detectada neste tecido. Western blotting para DPP IV e MEP 24.15 mostrou reducao correspondente na expressao de ambas as enzimas na aorta e um aumento para DPP IV no cerebro; nao houve alteracao na expressao da MEP 24.15 no pulmao e nem da NEP 24.11 no pulmao ou rim. A administracao do JA2 em SHR nao alterou as respostas a bradicinina. Estes resultados indicam que ha alteracoes na atividade e expressao das peptidases estudadas (exceto APM) nos dois modelos de hipertensao. Entretanto, a variabilidade nestas alteracoes entre os dois modelos sugere que a hipertensao per se nao e a causa principal destas diferencas, mas que provavelmente resultam de alteracoes bioquimicas associadas a cada modelo e seletivas para cada peptidase Abstract