前列腺素D 2 与F 2α 对绵羊黄体退化的影响及其机理研究

旨在研究前列腺素（prostaglandins，PGs）D2与F2α对绵羊黄体（corpus luteum，CL）组织形态、生殖激素及其关键基因与受体表达的影响，并解析其在黄体退化中的相互关系及机理，为保证母畜连续性繁育提供新的理论依据。将16只哈萨克绵羊随机分成4组，在发情周期的黄体期分别子宫肌内注射PGD2、PGF2α、PGD2+PGF2α及等量生理盐水（对照组），采用HE染色结合物理拍照对比处理前后黄体组织形态变化，ELISA法检测外周血清中P4、E2、PGD2和PGF2α浓度变化；并利用qRT-PCR和Western blot检测关键合成酶基因HPGDS、PGFS及其受体DP1、CRTH2、FP的mRNA和蛋白表达水平。结果显示，与对照组相比，发现PGD2+PGF2α组中黄体退化效果最明显，随后依次是PGF2α组明显大于PGD2组。ELISA结果显示，随着处理后时间的推移，不同试验处理组中，P4浓度均呈显著下降趋势（P < 0.05），其中在PGD2+PGF2α组中该变化趋势最显著（P < 0.05）；但E2、PGD2和PGF2α浓度均呈现不同差异性变化，其中，PGD2+PGF2α组中PGD2和PGF2α浓度呈显著下降（P < 0.05），PGF2α组中E2浓度呈显著升高（P < 0.05）、PGD2浓度呈显著下降（P < 0.05），PGD2组中E2浓度呈显著下降趋势（P < 0.05）、PGD2浓度呈显著升高趋势（P < 0.05）。qRT-PCR和Western blot结果显示，与对照组相比，PGD2+PGF2α组中HPGDS mRNA和蛋白表达量显著下调（P < 0.05），PGFS、CRTH2及FP mRNA和蛋白表达量显著上调（P < 0.05）；PGF2α组中HPGDS mRNA和蛋白表达量呈显著下调（P < 0.05），其它基因mRNA和蛋白表达量呈显著上调（P < 0.05）；PGD2组中HPGDS、DP1、PGFS及FP mRNA和蛋白表达量呈显著上调（P < 0.05）。同时，在不同受体基因表达量检测时，发现PGD2组中DP1受体表达量显著高于CRTH2受体（P < 0.05），而PGF2α组中CRTH2表达量则显著高于DP1（P < 0.05）。综上，PGD2无论单独使用还是结合PGF2α使用，均能够促进CL的退化，尤其是二者结合时有明显的协同促溶效应，其作用机制可能与其体内激素水平、关键合成酶及受体类型的表达有关，这为全面认识哺乳动物CL退化的调控机制奠定了基础，也为进一步优化高效繁殖技术（尤其是PGs方案）提供了新的思路。