Protective effect of heat preconditioning on NIH-3T3 fibroblast

目的 建立小鼠成纤维细胞系NIH-3T3预热适应细胞模型,探讨应激与适应对细胞活性和热休克蛋白90(HSP90)合成的影响.方法通过预热适应(42℃,20min)建立应激适应细胞模型,并通过再次热应激时(44℃,40min)细胞膜损伤指标、DNA损伤指标的变化综合评价适应效果.以Western blot法检测应激及适应对细胞内HSP90合成的影响.结果结合预热适应后再次热应激所致的细胞膜损害和HSP90合成情况,初步确定预热适应后6 h为最佳应激保护时间.预热适应6 h后,再次热应激时,培养液中乳酸脱氢酶(LDH)漏出变化率为15.4%±2.6%,对照组为41.2%±5.1%;DNA受损细胞所占百分比为15.1%,较直接热应激组(26.3%)轻.ODHSP90/ODcontrol变化趋势显示热应激40min后细胞内HSP90含量均呈下降趋势,直接热应激组为0.82±0.18,预热适应组为1.70±0.52,预热适应+热应激组为1.41±0.16.结论通过对NIH-3T3细胞进行预热处理,确定应激保护的时间点,建立了细胞应激适应模型;初步确认HSP90在该模型中的保护作用。