Estrategias de análisis por citometría de flujo de células dendríticas en sangre periférica de pacientes con Leishmaniasis cutánea Americana

La Leishmaniasis cutanea americana (LCA) presenta distintas formas clinicas activas con diferentes grados de severidad: cutanea localizada (LCL), difusa (LCD), cutanea mucosa (LCM) e intermedia (LCI). Las celulas dendriticas (CDs) estan involucradas en el inicio y regulacion de la respuesta inmunitaria protectora frente al parasito Leishmania , por lo cual su determinacion es importante para comprender la inmunopatologia relacionada con esta enfermedad y el desarrollo de nuevas alternativas terapeuticas. El objetivo de este trabajo fue estandarizar la estrategia de analisis por citometria de flujo, para medir la frecuencia y grado de maduracion/ activacion de las CDs circulantes de pacientes con LCA y sujetos sanos. El marcaje de inmunofluorescencia directa se realizo a 22 muestras de sangre completa con anticuerpos acoplados a fluorocromos: Lin-1-FITC, HLA-DR-PerCP, CD11c-FITC, CD123-PE, CD86-APC, CD83-APC. Las CDs se distinguieron entre las HLA-DR + Linaje - : la expresion de CD11c definio a CDs mieloides (CDsM) y CD123 a CDs plasmocitoides (CDsP). El grado de maduracion y activacion fue de acuerdo a CD86 y CD83, respectivamente. Las CDsM y CDsP eran mayores en los pacientes LCL comparado con control y pacientes LCI y LCD (p<0,05). La relacion CDsM/CDsP en pacientes LCI (10,5) fue mayor que en controles (7,47), LCL (7,06) y LCD (6,38). Los LCL tenian mayor proporcion de CDsM CD83 + que controles, LCI y LCD (p<0,05). La estrategia de analisis por citometria de flujo empleada nos permitio evaluar este grupo celular tan importante en la respuesta inmune frente a infecciones.