SELDI—TOF—MS二维内标法的建立和应用

目的探索表面增强激光解析电离飞行时间质谱（SELDI—TOF—MS）二维内标校准方法，解决SELDI—TOF—MS的准确度和重复性较差的技术瓶颈。方法采用人工合成纯化的多肽分子促肾上腺皮质激素（ACTH，MW：2465．75Da）作为内标物质，加入待测样品中进行SELDI—TOF—MS检测，通过内标物质在质谱图中横坐标（质荷比）和纵坐标（丰度）响应值校准，消除因操作条件的波动对分析结果产生的影响，以提高结果的准确度和重复性。结果加入终浓度为4．055μmol／L的ACTH对血清蛋白质谱图无明显影响；加入内标物浓度和其质谱峰丰度呈直线关系（P=0．9763）；分子量检测变异系数平均降低5．36倍（P〈0．001）；质谱峰丰度检测平均变异系数降低5．19倍（P〈0．001）。结论二维内标法显著提高了SELDI—TOF—MS测定蛋白分子量和丰度的准确度和重复性，是该技术进行质量控制和标准化的有效措施。