单细胞双重巢式PCR扩增X、Y染色体STS、AMEL同源序列行性连锁遗传病诊断

目的在单细胞水平建立一种简便、快速、高准确性的胎儿性连锁遗传疾病诊断方法，为无创性产前诊断性连锁遗传病和植入前遗传学诊断提供一定的理论与方法学依据。方法提取男女单个淋巴细胞各150例，共300个细胞。随机分成3组，每组男女细胞各50个，双重巢式PCR技术在单细胞水平同时扩增X-类固醇硫酸脂酶基因（steroid sulfatase gene，STS）／Y-假基因和牙釉质基因（amelogenin gene，AMEL），对照组用单重巢式PCR技术在单细胞水平分别扩增两基因，比较单、双重巢式PCR技术在单细胞水平的扩增率及性别诊断正确率。结果单重巢式PCR扩增男性细胞STS和AMEL的扩增率和性别诊断正确率分别是84％、76％和84％、84％；而双重巢式PCR技术同时扩增上述基因的扩增率和性别诊断正确率分别为98％、96％。后者与前两者相比扩增率和性别诊断正确率均明显提高，差异均有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。结论在单细胞水平性连锁遗传疾病诊断中，双重巢式PCR技术较单重巢式PCR技术具有较高的扩增率及正确率，并有助于发现等位基因脱扣。该法在无创性单基因伴性遗传病的产前诊断和植入前遗传学诊断中具有较高的实际应用价值。