定量检测HCMV pp67 mRNA快速诊断人巨细胞病毒活动性感染

目的 建立实时荧光定量逆转录PCR（Real time RT-qPCR）方法,检测外周血中人巨细胞病毒（HCMV）pp67mR-NA的拷贝数,用于临床快速诊断HCMV活动性感染。方法采用RT-qPCR测定86份癌症患者外周血标本中的HC-MVpp67mRNA拷贝数,并与HCMVpp65抗原血症检测及HCMV分离培养的实验结果进行比较。结果 86例癌症患者中,HCMV病毒分离检测阳性率3.49%（3例）;实时荧光定量RT-PCR检测阳性率17.44%（15例）,灵敏度为100%,特异性为85.54%;HCMV pp65抗原血症检测阳性率为10.47%（9例）,灵敏度为66.7%,特异度为92.8%。两者比较差异有统计学意义（P〈0.05）。通过受试者工作特征（ROC）曲线分析,RT-qPCR检测每2×105个外周血白细胞中HCMV拷贝数的截断点值为201.5;此病毒拷贝数可作为诊断HCMV活动性感染的参考阈值。结论 应用RT-qPCR检测HCMV活动性感染,灵敏度高、特异性好;并能够为抗病毒治疗供重要的参考依据。