白菜型冬油菜铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)基因的克隆及其在低温条件下的表达分析

超氧化物歧化酶（SOD）是一种逆境条件下清除细胞内活性氧的关键酶，而铜锌超氧化物歧化酶（Cu／Zn—SOD）是该酶系中最主要的活性氧清除剂，与植物的抗逆性关系密切。本研究根据已发表的十字花科植物Cu／Zn-SOD基因的编码区设计引物，采用RT-PCR克隆超强抗寒冬油菜陇油7号Cu／Zn—SOD的cDNA序列，该基因全长459bp。生物信息学分析表明，该基因与甘蓝型油菜（Brassicanapus）Cu／Zn—SOD基因同源性高达99％，编码1个亲水性稳定蛋白，无跨膜结构域和信号肽，具有胞质Cu／Zn-SOD超基因家族特有的序列特征和保守结构区域。半定量RT-PCR以及SOD酶活性分析表明，低温诱导条件下Cu／Zn—SOD基因差异表达，在白菜型冬油菜适应低温胁迫过程中发挥重要作用。超强抗寒冬油菜陇油6号品种低温诱导蛋白的SDS-PAGE分析以及蛋白串联质谱技术鉴定表明，Cu／Zn—SOD是受低温诱导表达的抗逆基因。