绿针假单胞菌GP72中 aurI / aurR 系统调控功能

背景绿针假单胞菌( Pseudomonas chlororaphis ) GP72是一株可生产吩嗪类抗生素吩嗪-1-羧酸(PCA)和2-羟基吩嗪(2-OH-PHZ)的生防根际促生菌。基因组比对发现GP72菌中存在 aurI / aurR 双元调控系统。 目的研究该系统对GP72中吩嗪类物质的调控作用。 方法将 aurI 基因在大肠杆菌中异源表达，用紫色杆菌CV026和根癌农杆菌NTL4做显色实验。构建基因敲除菌株和回补菌株，发酵测量突变株的生长曲线与总吩嗪产量。构建转录融合质粒，测定吩嗪合成基因启动子的转录水平。 结果显色实验显示， aurI 能产生多种信号分子，使CV026显紫色、NTL4显蓝色。分别单独敲除 aurI 和 aurR 基因，同时敲除 aurI/aurR 基因，吩嗪产量均会升高，而回补菌株吩嗪产量降为野生型水平。β-半乳糖苷酶活性测定结果显示，突变株的酶活比野生型高。 结论 aurI/aurR 负调控GP72的吩嗪合成，通过抑制吩嗪合成启动子的转录而影响吩嗪类物质的产量。